(1)靈敏度高,選擇性好:由于分光光度法的入射光以棱鏡或光柵為單色器,同時在狹縫的控制配合下可得一條譜帶很窄的單色光,因此其測定的靈敏度、選擇性和準確度均比比色法高。紫外-可見光分光光度法可測定微量標準物質(zhì),測定靈敏度可達l~10ug/m,光度計定量測定的精密度可達0.5%,甚至可以更低。
(2)無需樣品分離裝置:由于分光光度法使用的是純度較高的單色光,因此利用此方法測定含有兩種或兩種以上樣品組分時,不必先進行樣品分離處理,只需選用樣品組分特征波長的單色光就可進行測定分析。
(3)有多種定量方法:分光光度法不僅可采用線性回歸方式進行定量,而且可直接通過百分消光系數(shù)與摩爾消光系數(shù)換算公式進行定量,因而在定量方式上較比色法更具有實效性。
紫外可見分光光度計的基本結(jié)構(gòu)由五個部分組成:光源、單色器、吸收池、檢測器和信號指示系統(tǒng)。
(1)光源
紫外-可見分光光度計對光源的基本要求是應(yīng)在儀器操作所需的光譜區(qū)域內(nèi)能夠發(fā)射連續(xù)輻射,有足夠的輻射強度和良好的穩(wěn)定性,而且輻射能量隨波長的變化應(yīng)盡可能小。分光光度計中常用的光源有熱輻射光源和氣體放電光源兩類。
熱輻射光源用于可見光區(qū),如鎢絲燈和鹵鎢燈,可使用的范圍在340~1000nm。氣體放電光源用于紫外光區(qū),如氫燈和氘燈。近紫外區(qū)測定時常用氘燈,它可在160~375nm范圍內(nèi)產(chǎn)生連續(xù)光源,是紫外光區(qū)應(yīng)用zui廣泛的一種光源。
(2)單色器
單色器是能從光源輻射的復(fù)合光中分出單色光的光學(xué)裝置,其主要功能是產(chǎn)生光譜純度高的波長,且波長在紫外可見區(qū)域內(nèi)任意可調(diào)。
單色器一般由入射狹縫、準光器(透鏡或凹面反射鏡使入射光成平行光)、色散組件、聚焦組件和出射狹縫等幾部分組成。其核心部分是色散組件,起分光的作用。
(3)吸收池吸收池用于盛放分析試樣,一般有石英和玻璃材料兩種。石英池適用于可見光區(qū)及紫外光區(qū),玻璃吸收池只能用于可見光區(qū)。在高精度的化學(xué)分析測定中,吸收池要挑選配對的。
(4)檢測器
環(huán)境監(jiān)測檢測器的功能是檢測信號,測量單色光透過溶液后光強度變化的一種裝置。常用的環(huán)境監(jiān)測檢測器有光電池、光電管和光電倍增管等。
(5)信號指示系統(tǒng)
其作用是放大信號并以適當(dāng)方式指示或記錄下來。常用的環(huán)境檢測信號指示裝置有直讀檢流計、電位調(diào)節(jié)指零裝置以及數(shù)字顯示或自動記錄裝置等。很多型號的分光光度計裝配有微處理機,可對分光光度計進行操作控制和數(shù)據(jù)處理。