所謂分光,是利用色散現(xiàn)象可以將波長范圍很寬的復(fù)合光分散開來,成為許多波長范圍狹小的“單色光”,這種作用稱為“分光”。像我們所知的,使用棱鏡可以將太陽光分解為七色光,彩虹的形成就是為人所熟知的分光現(xiàn)象。
分光不同于棱鏡分光(折射法)一種。但其他的分光現(xiàn)象一般需要較為復(fù)雜的方法實(shí)現(xiàn),不太常見。具體的類型如下:
1)利用棱鏡來分光(光的折射率依賴于波長);
2)利用衍射現(xiàn)象來分光;
3)利用法布里-珀羅標(biāo)準(zhǔn)具來分光;
4)利用邁克爾遜干涉+傅立葉變換的傅立葉分光:
5)利用光散射的分光。
分光光度計(jì)使用了兩個(gè)部分來實(shí)現(xiàn)其檢測的功能。第一部分是分光,將所使用的特定光源所發(fā)出的復(fù)合光分解為“單色光”,這些光通過樣品,一部分光會(huì)被吸收或反射。第二部分是檢測裝置,對(duì)通過了樣品的光進(jìn)行分析,可以了解到某一波長段的光會(huì)出現(xiàn)大幅減少或其他的變化。這些變化的原因正是樣品中含有某些特定的物質(zhì)造成的。
分光光度計(jì)的具體使用方法:
(1)儀器預(yù)熱。打開樣品室蓋(光門自動(dòng)關(guān)閉)。開啟電源,指示燈亮,儀器預(yù)熱20 min。選擇開關(guān)置于“T”旋鈕,使數(shù)字顯示為“00.0”。
(2)旋動(dòng)波長手輪,把所需波長對(duì)準(zhǔn)刻度線。
(3)將裝有溶液的比色皿放置比色架中,令參比溶液置于光路。
(4)蓋上樣品室蓋,調(diào)節(jié)透光率“100%T”旋鈕,使數(shù)字顯示為“100.0T”。(如顯示不到100%T,則可加按一次。
(5)吸光度A的測量:儀器調(diào)T為0和100%后,將選擇開關(guān)轉(zhuǎn)換至A調(diào)零旋鈕,數(shù)字顯示應(yīng)為“.000”。然后拉出拉桿,使被測溶液置入光路,數(shù)字顯示值即為試樣的吸光度A。
(6)測定完畢后,先打開樣品室蓋,再斷電源。比色杯應(yīng)清洗干凈后,再貯放保存。